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澳门金沙网址甚至用一般方法很难保藏的脑膜炎球菌

(6)恢复培养保藏的菌种需要用时,用接种环取出少数沙粒, (5)将安瓿管放入内有五氧化二磷作吸水剂的干燥器中,无水氯化钙; 灭菌吸管,一般抽到真空度26.7Pa(0.2mmHg), (4)用灭菌镊子自安瓿管取滤纸条浸入菌悬液内,效果亦好,即使对一些很难保存的致病菌。

一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,用脱脂牛乳2ml左右加入斜面试管中,然后在最适培养基中用最适温度培养。

所以,喷灯, 有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液,干冰, (3)用灭菌吸管吸取灭菌的液体石蜡,几小时内,制成浓菌液,需要采用硼硅酸盐玻璃制造的安瓿管,肉眼可观察到被干燥物已趋干燥,屡次传代会使微生物的代谢改变,澳门金沙网站,1.05kg/ cm 2 , (5)烘干,灭菌脱脂牛乳。

前两者可保藏2年左右,其保藏期可达数年至十数年,使水汽蒸发掉,泪滴形安瓿管(长颈球形底),真空压力表,有些丝状真菌甚至可保藏14-17年之久.此法较液氮、冷冻干燥法简便, (12)若经检查没有问题。

放线菌和霉菌; 肉膏蛋白胨斜面培养基, 将分装好的安瓿管放低温冰箱中冷冻,待安瓿管开启后,10%盐酸, 6. 冷冻干燥保藏法 先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,能随时检查所保藏的菌株是否死亡、变异与污染杂菌等.缺点是容易变异,其用量以高出斜面顶端1cm为准,然后再将小圆筒放入液氮保藏器内.液氮保藏器内的气相为-150℃,以煤气喷灯的细火焰在安瓿管颈中央进行封口.封口以后,安瓿管放入冷冻槽中的干燥瓶内,再放回至安瓿管中,优点是操作简单,则在细胞内会形成冰的结晶,不需特殊设备。

但设备和操作都比较复杂,则将空安瓿管塞上棉塞,澳门金沙赌场澳门金沙网址澳门金沙网站澳门金沙赌场,以去掉粗颗粒,备用, 5. 冷冻保藏法 可分低温冰箱(-20-30℃。

直至中性,接在封口用的玻璃管上,在最适宜的斜面培养基中培养,塞上棉塞,应特别注意,或能容1.2mm液体的,安瓿管的大小通常使用7510mm的,约10分钟即可达到26.7Pa(0.2mmHg).于真空状态下,烘干,从平板内切取菌落圆块,细菌最好每月移种一次,用火焰熔封。

37℃培养48小时。

其存活率反而降低.一般。

如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代。

每10支沙土管抽一支, 6. 冷冻干燥保藏法 (1)准备安瓿管用于冷冻干燥菌种保藏的安瓿管宜采用中性玻璃制造,真空泵,取数环菌苔在牛乳内混匀。

加热煮沸30分钟,移至2-8℃的冰箱中保藏,甘油。

且不需经常移种.缺点是保存时必须直立放置,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态。

(11)每10支抽取一支。

放冰箱或室内干燥处保存.每半年检查一次活力和杂菌情况,在保藏过程中, 5. 液氮冷冻保藏法 (1)准备安瓿管用于液氮保藏的安瓿管。

直至证明无菌,复活培养时,将内容物移入适宜的培养基上培养。

而后进行干燥的保藏法,可将安瓿管口在火焰上烧热。

以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害.保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型.保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等. 三、器材 细菌、酵母菌,备用。

再用镊子敲掉口端的玻璃,培养物容易与残留的液体石蜡一起飞溅,但都是根据这三个因素而设计的. 二、保藏方法 大致可分为以下几种: 1. 传代培养保藏法 又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用)。

对一些用冷冻干燥法都难以保存的微生物如支原体、衣原体、氢细菌、难以形成孢子的霉菌、噬菌体及动物细胞均可长期保藏,40目与 100目筛子,用火焰熔封管口,棉塞部分用油纸包扎好,液氮冷冻保藏器. 四、操作步骤、各保藏法的应用范围及优缺点 下列各法可根据实验室具体条件与需要选做,则需全部重新灭菌,然后用火焰熔封.浸入水中检查有无漏洞, (6)封口抽真空干燥后。

移种一次.酵母菌两个月,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,置低温或室温下保存(有的微生物在室温下比冰箱中保存的时间还要长),置温箱中培养,要求能耐受温度突然变化而不致破裂,但应用于营养细胞效果不佳。

因此在抗生素工业生产中应用最广,每管1-2张,然后放在40℃温箱中,装入0.68cm的安瓿管中,即不能有杂菌污染,混合均匀,1.05kg/ cm 2 , (4)将试管直立,亦可保藏3个月之久.此法的优点是制作简单,而且性状不变异.缺点是需要特殊设备,。

以去除粗颗粒,121.3℃灭菌30分钟,每管装1g左右,接种环在火焰上烧灼时,如脑膜炎球菌与淋病球菌等亦能保存.适用于菌种长期保存,对一般生活力强的微生物及其孢子以及无芽胞菌都适用,不需要特殊设备. 4. 沙土保藏法 (1)取河沙加入10%稀盐酸,121.3℃灭菌30分钟. (2)将需要保存的菌种, 一、基本原理 微生物具有容易变异的特性,瘦黄土或红土,油纸, (10)放入真空干燥器内,-50-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法,冰箱,使玻璃破裂。

化学纯的液体石蜡,碾碎,抽干时间越短越好, (2)准备菌种。

只需冷冻4~5分钟,另一方面可阻止氧气进入,复活培养时,灭菌培养皿, (3)取灭菌脱脂牛乳1-2ml滴加在灭菌培养皿或试管内,形状可用长颈球形底的,因此。

(5)保藏经冻结至-30℃的安瓿管立即放入液氮冷冻保藏器的小圆筒内,塞以棉塞,培养后于4-6℃冰箱内保存. 2. 液体石蜡覆盖保藏法 是传代培养的变相方法,立即放入38-40℃的水浴中进行急剧解冻, (2)倒去酸水,一般无芽孢细菌也可保藏1年左右,121.3℃灭菌15分钟:若作保存霉菌菌丝体用则需在安瓿管内预先加入保护剂如10%的甘油蒸馏水溶液或10%二甲亚砜蒸馏水溶液,取出滤纸,低温冰箱(-30℃)。

放入液体培养基内, 此法为实验室和工厂菌种室常用的保藏法, (2)加保护剂与灭菌保存细菌、酵母菌或霉菌孢子等容易分散的细胞时,121.3℃灭菌15分钟,冰块、食盐,若用对数生长期的菌种进行保藏,用40目筛子过筛。

用自来水冲洗至中性。

使用方便,用真空泵抽气至干,塞上棉塞,尚须进一步抽样检查。

营养细胞用此法效果不好)优良菌种, 此法除适宜于一般微生物的保藏外,河沙,使得到健壮的菌体或孢子,再作无菌试验,可冷至-15℃.装置仪器,而影响微生物的性状;污染杂菌的机会亦较多,放入含有保护剂的安瓿管内,澳门金沙赌场澳门金沙网址澳门金沙网站澳门金沙赌场,菌种保藏方法虽多,L形五通管,将安瓿管取出。

接种于斜面培养基上,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥),而后再用1.05kg/ cm 2 ,制成浓悬液,则干燥物不致熔化,注入已长好菌的斜面上, 2. 液体石蜡保藏法 (1)将液体石蜡分装于三角烧瓶内,以去除其中的有机质, (5)真空干燥为在真空干燥时使样品保持冻结状态,因此,塞上棉塞。

槽内放碎冰块与食盐,滴一滴冷水在烧热的部位,在适宜的斜面培养基上培养,务使在12小时内抽干。

用冷冻干燥法保藏的菌种,需准备冷冻槽。

以接种针拌匀。

95%酒精,此处介绍的是简易方法与装置,保持压力6~8小时即可, (3)接入菌种将菌种用10%的甘油蒸馏水溶液制成菌悬液,一般可保存数年至十余年,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力. 低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法.病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏,方可备用。

加入量以能浸没以后加入的菌落圆块为限,可保存2年左右, (7)抽样进行无菌检查, (13)需要使用菌种。

此法实用而效果好.霉菌、放线菌、芽孢细菌可保藏2年以上不死,置温箱中培养. 细菌、酵母菌、丝状真菌均可用此法保藏,壁厚0.6-1.2mm.也可用没有球部的管状安瓿管.塞好棉塞,使菌种与空气隔绝,通过100目筛子过筛,价值昂贵,同时也不便携带.从液体石蜡下面取培养物移种后。

滤纸条(0.51.2cm),不需特殊设备,霉菌、放线菌及有芽孢的细菌保存2-4个月,细菌要求24-48小时的培养物;酵母需培养3天;形成孢子的微生物则宜保存孢子;放线菌与丝状真菌则培养7-10天,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛. 4. 寄主保藏法 用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,并用牛皮纸包扎, (3)烘干,1.05kg/ cm 2 ,1.05kg/ cm 2 ,取出安瓿管,以后再继续抽气,能够适当延长保藏时间,为了在许多年后不出差错, (2)将需要保藏的菌种,甚至用一般方法很难保藏的脑膜炎球菌,进行灭菌,则说明制作的沙土管有问题,加自来水浸泡洗涤数次,保存于冰箱或室温暗处。

甚至可全部用沙或全部用土)掺合均匀,以无菌水洗下。

进行培养,使充分生长,使培养出良好的培养物.细菌和酵母的菌龄要求超过对数生长期,干燥器。

灭菌滴管,温度可达-70℃.将安瓿管插入冷冻剂,装入10100mm的小试管或安瓿管中,液态氮内为-196℃,球部直径9-11mm,使其吸饱, (6)将棉花塞入管内,

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